紫外分光光度计通过物质在光的照射激发下，产生了对光的吸收效应，物质对光的吸收具有选择性的。各种不同的物质都具有各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶剂时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度与物质的浓度有一定的比例关系。用于定量时，在吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法算出样品溶液的浓度。

　　紫外分光光度计使用经验：

　　1)若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0”和“100%”然后再测量。

　　2)指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况，需进行机械调零。

　　3)比色皿使用完毕后，请立即用蒸馏水冲洗干净，并用干净柔软的纱布将水迹擦去，以防止表面光洁度被破坏，影响比色皿的透光率。

　　4)操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯，以免影响光效率。

　　5)放大器灵敏度换挡后，必须重新调零。

　　6)比色杯的配套性问题。比色杯必须配套使用，否则将使测试结果失去意义。在进行每次测试前均应进行比较。

　　紫外分光光度计应用：用作物质鉴定、纯度检查，有机分子结构的研究。在定量方面，可测定结构比较复杂的化合物和混合物中各组分的含量，也可以测定物质的离解常数，络合物的稳定常数物质分了量鉴别和微量滴定中指示终点以及在高效液相色谱中作检测器等。