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分光光度计对土壤速效磷的测定
时间:2013-08-07 点击次数:1748

摘要:磷存在与人体所有细胞中,是维持骨骼和牙齿的必要物质,几乎参与所有生理上的化学反应。磷还是使心脏有规律地跳动、维持肾脏正常机能和传达神经刺激的重要物质。

      一、前沿掌握比色法测定土壤速效磷的方法,了解土壤中磷素形态及其土壤供磷能力与土壤速效磷的关系。掌握土壤速效磷的浸提,浸提液的处理,标准曲线制作,显色,比色,计算。

      二、内容与原理酸性土壤中的磷主要是以Fe—P,A1—P的形态存在,利用氟离子在酸性溶液中络合Fe3 和Al3 的能力,可使这类土壤中比较活性的磷酸铁铝盐被陆续活化释放,同时由于H 的作用,也能溶解出部分活性较大的Ca—P,然后用钼锑抗比色法进行测定。

      三、主要仪器及试剂配制仪器:塑料杯,往复式振荡机,分光光度计或光电比色计试剂: (1)0.03molL-1NH4F—0.025 molL-1HCl浸提剂称取1.11克NH4F溶于800毫升水中,加1.0molL-1HCl25毫升,然后稀释至1升,贮于塑料瓶中,其它试剂同前法。

      (2)钼锑抗试剂 称取酒石酸锑钾(KSbOC4H4O6)0.5克,溶于100毫升水中,制成5%的溶液。

      另称取钼酸铵20克溶于450毫升水中徐徐加入208.3毫升浓硫酸,边加边搅动,再将0.5%的酒石酸锑钾溶液100毫升加入到钼酸铵液中,zui后加至1升,充分摇匀,贮于棕色瓶中,此为钼锑混合液。

       临用前(当天)称取1.5克左旋抗坏血酸溶液于100毫升钼锑混合液中,混匀。此即钼锑抗试剂。(有效期24小时,如贮于冰箱中,则有效期较长。)

       (3)磷标准溶液称取0.439克KH2PO4(105℃烘2小时)溶于200毫升水中,加入5毫升浓H2SO4,转入1升量瓶中,用水定容,此为100 mgkg-1磷标准液,可较长时间保存。取此溶液稀释20倍即为5 mgkg-1磷标准液,此液不宜久存。

      四、操作方法与实验步骤1、称取通过1毫米筛孔的风干土样品5克(到0.01克)于150毫升塑料杯中,加入0.03molL-1NH4F—— 0.025 molL-1HCl浸提剂50毫升,在20—30℃条件下振荡30分钟,取出后立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于塑料杯中,同时作试剂空白试验。

       2、吸取滤液10—20毫升于50毫升容量瓶中,加入10毫升0.8M H3BO3,再加入二硝基酚指示剂2滴,用稀HCl和Na0H液调节pH至待测液呈微黄,用钼锑抗试剂5毫升显色,并用蒸馏水定容,摇匀,在室温高于15℃的条件下放置30分钟,用红色滤光片或660nm波长的光进行比色,以空白溶液的透光率为100(即光密度为0),读出测定液的光密度,在标准曲线上查出显色液的磷浓度(mgkg-1)。

      3、标准曲线制备:吸取含磷(P)5mgkg-1的标准溶液0、1、2、3、4、5、6毫升,分别加入50毫升容量瓶中,加入10毫升0.8M H3BO3,再加入二硝基酚指示剂2滴,用稀HCl和Na0H液调节pH至待测液呈微黄,再加入钼锑抗显色剂5毫升,摇匀,定容即得0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mgkg-1磷标准系列溶液,与待测溶液同时比色,读取吸收值,在方格座标纸上以吸收值为纵座标,磷mgkg-1数为横座标,绘制成标准曲线。
 

 

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